关于层析柱选择的几个关键要点

怎么选择层析柱呢,其实有时候是困扰客户的问题:

层析空柱(Chromatographic column)是用于装填层析介质的载体,在抗体、疫苗、病毒、质粒、天然产物等组分分离纯化过程中起着关键性的作用,适用于凝胶层析(分子筛层析),离子交换层析,亲和层析,疏水层析,C18等

层析柱选择的几个关键要点:

首先:需要确认层析柱介质的种类,比如分子筛或者亲和层析,确认好体积和高度

层析柱规格:内径10mm,16mm,26mm,50mm,100mm,200mm,300mm,450mm

高度:长度15cm,20cm,30cm,40cm,60cm,100cm

材质:层析柱内层采用玻璃材质,一般对玻璃精密度有要求,以保证主体的圆弧度

其次:筛网材质和孔径

筛网:根据层析介质的粒径大小选择筛网的孔径,一般来说筛网的孔径为层析介质的1/3大小

分配:良好的分配是保证层析柱柱效和样品分离的关键,起着重要作用(理论塔板数=5.54(保留时间/半高峰宽)2 (2是平方))

再次:粒径的线流速和压力,层析柱调水平

线流速ch/h:根据填料的粒径和线流速来选择层析柱的耐压压力,比如葡聚糖或琼脂糖凝胶90um的填料,正常120cm/h线流速在3bar以内,粒径偏小,压力上升,反之。但如果是聚苯乙烯基质等聚合物基质,则建议选择耐压高一些的层析柱

支撑:可以调节水平的方式,保证层析柱柱床的稳定性。或者用夹子直立夹住也可,根据柱子内径可自由选择。